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如何用離心機進行兩蟲的檢測
點擊次數:2172 更新時間:2017-07-18
賈第鞭毛蟲與隱孢子蟲(簡稱“兩蟲”)是兩種嚴重危害飲用水水質安全的病原微生物。“兩蟲”具有個體微小,致病量低、感染途徑和方式簡單,流行分布廣泛的特點。2006年我國《生活飲用水衛生標準》增加了“兩蟲”檢測,規定每10L小于1個孢囊或卵囊。今天小編為大家介紹如何用離心機來進行兩蟲的檢測。
首先要進行接種和樣品的淘洗和濃縮,然后開始離心。
a. 離心機應放在牢固的工作臺或地板上,盡量減少晃動。
b. 平衡對稱的離心管,和適配器、離心桶一起平衡,重量差別不超過0.5g, 盡量減少擺動。注意:如果離心管不被平衡則會產生額外的震動,影響到目標物的沉淀。
c. 設置離心機參數2000g,15min。樣品在離心機中自然慣性停止,不可使用剎車系統急停。
d.用真空泵或蠕動泵吸取離心管中的上清液,在進口處裝一個移液器以減少進口的真空力度。zui終留取5-8ml(可預先在管上做好標記)。流速控制在200±20ml/min。注意把移液管放到液面中心,接近液面處上吸取上清液,以減少沉淀的損失。
e. 將離心管中的剩余的濃縮液在渦旋混合器上混勻20秒。
f. 用緩沖液潤洗移液器將所有液體轉移至L型試管中。(注意:移液器需要用緩沖液潤洗下,是為了避免移液管壁因干燥而將兩蟲掛壁。)
g. 使用純水清洗兩次移液管(如剩余體積為7ml,則每次1.5ml),并將清洗 液移入同一個L型試管中,每次沖洗后都要停留20秒再移出液體。
離心機離心和移液結束后,再進行兩蟲的捕獲和染色,zui后分析免疫熒光檢驗的結果就可以判斷兩蟲的情況了。
首先要進行接種和樣品的淘洗和濃縮,然后開始離心。
a. 離心機應放在牢固的工作臺或地板上,盡量減少晃動。
b. 平衡對稱的離心管,和適配器、離心桶一起平衡,重量差別不超過0.5g, 盡量減少擺動。注意:如果離心管不被平衡則會產生額外的震動,影響到目標物的沉淀。
c. 設置離心機參數2000g,15min。樣品在離心機中自然慣性停止,不可使用剎車系統急停。
d.用真空泵或蠕動泵吸取離心管中的上清液,在進口處裝一個移液器以減少進口的真空力度。zui終留取5-8ml(可預先在管上做好標記)。流速控制在200±20ml/min。注意把移液管放到液面中心,接近液面處上吸取上清液,以減少沉淀的損失。
e. 將離心管中的剩余的濃縮液在渦旋混合器上混勻20秒。
f. 用緩沖液潤洗移液器將所有液體轉移至L型試管中。(注意:移液器需要用緩沖液潤洗下,是為了避免移液管壁因干燥而將兩蟲掛壁。)
g. 使用純水清洗兩次移液管(如剩余體積為7ml,則每次1.5ml),并將清洗 液移入同一個L型試管中,每次沖洗后都要停留20秒再移出液體。
離心機離心和移液結束后,再進行兩蟲的捕獲和染色,zui后分析免疫熒光檢驗的結果就可以判斷兩蟲的情況了。
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